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ELISA試劑盒的標(biāo)本如何融凍?

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       ELISA試劑盒以其特重復(fù)性好、異性強(qiáng)、敏感性高等優(yōu)點(diǎn),在科研中深受各大科研工作者的喜愛。ELISA試劑盒的特異性與試劑盒的關(guān)鍵組分、抗體對(duì)有關(guān),若抗體對(duì)中之一為多抗,另一個(gè)必須為單抗,建議使用雙單抗。ELISA試劑盒的靈敏度反映的是試劑盒檢出被檢物質(zhì)的較低量的能力,用戶可根據(jù)自己樣本中待檢指標(biāo)的量選擇合適的試劑盒,如果待檢指標(biāo)量很低,一般的試劑盒不能滿足要求,可選擇高敏的ELISA試劑盒。
  ELISA試劑盒標(biāo)本的重復(fù)凍融所發(fā)作的機(jī)械剪切力將對(duì)標(biāo)本中的蛋白等分子發(fā)作損壞作用,然后導(dǎo)致假陰性作用。凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)留心,不要進(jìn)行劇烈振蕩,重復(fù)倒置混勻即可。標(biāo)本在保存中如出現(xiàn)細(xì)菌污染所構(gòu)成的的混濁或絮狀物時(shí),應(yīng)離心堆積后取上清查看。一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會(huì)對(duì)用相應(yīng)酶作符號(hào)的測定辦法發(fā)作非特異性攪擾。血清標(biāo)本如是以無菌操作分別,則可以在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則主張冰凍保存。
  ELISA試劑盒要留心避免出現(xiàn)嚴(yán)峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),其有相似過氧化物的活性。在以HRP為符號(hào)酶的ELISA測定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很簡單在溫育過程中吸附于固相,然后與后邊參加的HRP底物反響顯色。樣本的搜集及血清分別中要留心盡量避免細(xì)菌污染,一則細(xì)菌的成長,其所排泄的一些酶或許會(huì)對(duì)抗原抗體等蛋白發(fā)作分解作用。樣本的長時(shí)間保存,應(yīng)在-70℃以下。ELISA試劑盒冰凍保存的血清標(biāo)本須留心避免因停電等構(gòu)成的重復(fù)凍融。
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