DNA提取試劑盒是根據(jù)氯化芐法構(gòu)建的,能夠從樣本中提取基因組DNA的試劑盒。
C7H7Cl具有能將含有纖維素等的細(xì)胞壁中的羥基芐基化,從而破壞細(xì)胞壁的特性。
DNA提取試劑盒的保存方式:
室溫。低溫保存可能會有沉淀析出。如果發(fā)生析出現(xiàn)象,請于50℃溶解后,再于室溫保存。
DNA提取試劑盒的操作方法:
全套操作約需1小時,分勻漿、細(xì)胞裂解、除蛋白、DNA純化等步驟,詳細(xì)說明如下。
勻漿和細(xì)胞裂解:
使用不同的實驗材料需采用不同的勻漿步驟,具體說明如下:
【從動物組織中提取基因組DNA】
使用研缽進(jìn)行勻漿時:
?、?取1~100 mg的動物組織或人組織移入冰浴預(yù)冷的研缽中,快速用力展研成勻漿。
注)下列組織請加液氮研磨至粉末狀。
A.富含DNA酶的胰臟、脾臟、胸腺、淋巴等組織。
B.富含膠原蛋白的皮膚、肌腱等組織。
C.富含角質(zhì)蛋白的組織或堅硬的組織(如骨骼)等。
② 加入650 μl的Solution A和0.9 μl的RNase A1,溫和研磨30秒鐘。
注)使用上述①-注)的實驗材料時,請在加入Solution A及RNase A1后,將研缽置于65℃水浴上研磨1分鐘。
?、?收集650 μl研磨好的組織勻漿液移至Collection Tube中。如果勻漿體積不足650 μl,請補充Solution A至650 μl,65℃保溫5分鐘。
使用研磨棒進(jìn)行勻漿時:
?、?取1~100 mg的動物組織或人組織移入冰浴預(yù)冷的Collection Tube 中,用研磨棒快速研磨成糊狀。
?、?加入350 μl的Solution A和0.9 μl的RNase A1后用研磨棒快速研磨成勻漿。
?、?加入350 μl的Solution A將研磨棒上的勻漿沖入Collection Tube中,充分振蕩混合后,65℃保溫5分鐘。